ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММАРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССОВ М И G — ИНФОРМАТИВНЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ ЛЯМБЛИОЗА, АСКАРИДОЗА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММАРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССОВ М И G — ИНФОРМАТИВНЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ ЛЯМБЛИОЗА, АСКАРИДОЗА
© Коллектив авторов, 2015
УДК 616-07;616.9
Ортикова М.М., Мирзоева З.А.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММАРНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССОВ М И G — ИНФОРМАТИВНЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ ЛЯМБЛИОЗА, АСКАРИДОЗА
Кафедра семейной медицины ГОУ ИПОвСЗ РТ
Ortikova M.M., Mirzoeva Z.A.
DETERMINATION OF TOTAL IMMUNOGLOBULIN CLASSES M AND G — INFORMATIVE METHOD OF DIAGNOSIS OF GIARDIASIS, ASCARIASIS
Department of Family Medicine of the State Educational Establishment «Institute of Postgraduate Education in Health Sphere of Republic of Tajikistan»
Цель исследования. Проведение исследования на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид, лямблий в крови человека методом иммуноферметного анализа.
Материал и методы. В исследовании участвовали 35 членов семей, живущих на территории, которую обслуживает ГЦЗ №1 города Душанбе, не имеющие жалоб. Мужчин было 19 (54%), женщин — 16 (46,0%). Методы исследования: лабораторные, статистические.
Результаты. При исследовании крови на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид методом иммуноферментного анализа положительные результаты выявлены у 14 (31,4%) членов семьей: женщин 8 (57,1%), мужчин 6 (42,8%); 8 (57,1%) человек организованного (работающего) населения, 6 (42,8%) неорганизованных (не работающих). При определении титра АТ-1:100 — 5 (35,7%), АТ-1:200 — 9 (64,9%). При исследовании АТ к аскаридам выявлено, что заражённость чаще встречается среди женщин, у организованного контингента населения. Из общего числа исследуемых 64,9% членов семей заражены аскаридозом.
Исследование крови на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам лямблий методом иммуноферментного анализа выявило положительные результаты у 10 человек (28,5%), из них у 4 женщин (40,0%), 6 мужчин (60%). Из них 8 (80%) человек — организованное (работающие), 2 (20%) — неорганизованное население. По определению титра: АТ-1:200 — 8 человек (80%), АТ-1:800 — 2 человека (20%). Из общего количества исследуемых у 20% членов семей, заражённых лямблиозом, частота распространенности больше среди организованного населения и среди мужского пола.
Заключение. Параллельное использование копрологических и серологических методов диагностики позволяет более надежно и эффективно выявлять аскаридоз, лямблиоз.
Ключевые слова: иммуноглобулины М, G, диагностика, лямблиоз, аскаридоз, задача, семейный врач, ПМСП
Aim. Conducting a study on the presence of total immunoglobulin classes M and G to antigens of ascarids, giardia in human blood by immunoenzyme analysis.
Materials and methods. The study involved 35 family members living in the city of Dushanbe GTSZ N»1 without complaints. There were 19 (54%) men and 16 (46.0%) — women.
Results. During the study of blood for presence of total immunoglobulin classes M and G to antigens of Ascaris, by ELISA positive results were found in 14 (31,4%) members of the family: 8 women (57,1%), 6 males (42,8%); 8 (57,1%) had organized (working) population, 6 (42,8%) of unorganized (non-working). In our study, the titer of antibody was determined to determine the duration of the disease. By titration of AT 1:100 — 5 (35,7%), AT-1: 200 — 9 (64,9%). In the study of antibodies to roundworm found that the infestation is more common among females, have organized a contingent of the population. Of those studied, 64.9% of family members infected with ascariasis.
Blood test for the presence of total immunoglobulin classes M and G lamblia antigens by ELISA revealed positive responses in 10 persons (28,5%) among the surveyed family members, of whom — 4 women (40,0 %), 6 men (60%). Of the total number of persons with a positive result to the antigens of Giardia organized (working) — 8 (80%), fugitive (non-working) — 2 people (20%). According to the definition of titer: AT-1:200 — 8 people (80%), AT-1:800 — 2 person (20%). Of the total study 20% of family members infected with Giardia, the prevalence of greater among organized among males.
Conclusion. Concurrent use of koprological and serological methods of diagnosis allows more reliably and efficiently identify ascariasis, giardiasis.
Key words: immunoglobulins M, G, diagnostics, giardiasis, ascariasis, task, a family physician, primary care
Актуальность
Рутинные методы диагностики глистно-паразитарных инвазий у членов семей (метод копроскопи- ческого исследования кала на яйца глистов, соскоб на энтеробиоз) малоинформативны. ПЦР-диагно- стика — определение иммуноглобулинов и определение суммарных иммуноглобулинов классов М и G — достаточно информативный метод [1-5].
Лямблиоз распространен повсеместно, заболеваемость в пределах 0,5-18%. Среди детей пораженность лямблиями достигает 27-70%. В России лямблиоз является распространенным протозоозом. Так, у детей в возрасте до 14 лет заболеваемость в отдельные годы составляют 360 на 100 тыс. детского населения. Источник инфекции — больной или носитель [1, 3, 6].
Восприимчивость к лямблиозу высокая, особенно среди ослабленных детей и лиц с иммунодефицитом. Имеется генетическая предрасположенность: к лямблиозу более восприимчивы люди с HLAB5, DR3, DR4, DR7 A9 [2-4].
Лямблиоз широко распространен в детских дошкольных и исправительных учреждениях, где инвазивность лямблиями составляет 2040%. Эндемические очаги инфекции в Мексике, Великобритании, США наиболее часты с июля по октябрь среди детей до 5 лет и взрослых в возрасте 25-39 лет [1, 4].
Серологическая диагностика лямблиоза имеет вспомогательное значение. Наиболее часто используется ИФА для обнаружения противо- лямблиозных антител либо специфических ^М, IgG [3, 5]. Многочисленными исследованиями установлено, что лямблиозная инвазия встречается среди здорового населения повсеместно, независимо от климатических условий и в среднем наблюдается у 10% взрослых [4].
Аскаридоз — один наиболее широко распространённых в мире гельминтозов, которым заражен каждый четвертый человек на земном шаре. Ежегодный показатель заболеваемости аскаридозом составляет 85-90 случаев на 100 000 населения. Большую часть заболеваний аскаридозом выявляют у городских жителей (около 60% случаев). Среди инвазированных аскаридами сохраняется преобладание детей (до 65%). Аскаридоз распространён повсеместно [7, 8].
Аскаридоз — пероральный геогельминтоз, антропоноз. Восприимчивость всеобщая, дети поражаются чаще, чем взрослые. Аскаридоз широко распространен в мире [5].
Диагноз инвазии гельминтами основывается на эпидемиологическом анализе, клинико-лабораторных данных и требует подтверждения методами специфической диагностики — паразитологическими, серологическими. В случаях низкой интенсивности, а также для обнаружения гельминтов применяют серологические тесты [3].
Материал и методы исследования
В исследовании участвовали 35 членов семей, относящихсязоне обслуживания ГЦЗ №1 города Душанбе, которые не имели жалоб. Мужчин было 19 (54%), женщин — 16 (46,0%).
Статический анализ результатов исследования проводился базами данных Clipper.
Результаты и их обсуждение
Нашей задачей является проведение исследования на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид, лямблий в крови человека методом иммуноферметного анализа. Методом выборки были отобраны члены семей, живущие в благоустроенных четырёх- и пятикомнатных квартирах с централизованным источником водоснабжения, где холодная вода идёт постоянно только зимой. В летний сезон на третьем и четвёртом этажах холодная вода имеется только ночью, в течение дня жители используют собранную воду из ёмкостей. Перед исследованием семейным врачом был проведён махаллинский совет на тему: «Глистная инвазия, пути передачи, методы диагностики, профилактика». Мы совместно с медицинской сестрой участка посетили семьи, объяснили цель визита, причины предстоящего исследования. Были сделаны списки исследуемых членов семей, каждому члену присвоен идентификационный номер для сдачи общего анализа крови, мочи и кала, крови на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид, лямблий методом иммуноферментного анализа. После консультирования по технике сбора мочи, кала были предоставлены одноразовые пластиковые контейнеры каждому члену семьи по две штуки: один для сбора мочи, другой для сбора кала. Накануне никакая диета не назначалась и противоглистные препараты не выдавались. При сборе мочи указывалось, что её необходимо собирать утром, спустив первую порцию в унитаз, а среднею порцию собрать в пластиковый стаканчик; кал на яйца глистов собирался в количестве от 10 до 15 г в пластиковые контейнеры из свежевыделенных фекалий. Необходимые утренние анализы были собраны и предоставлены в лабораторию. По плану, семейным врачом при ежегодном плановом осмотре проводится интервью о гигиенических навыках, санитарных условиях в квартире, где живёт исследуемый. Кровь для исследования на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид, лямблий в крови человека методом иммуноферментного анализ собиралась в ГЦЗ №1 в количестве 5,0 мл одноразовыми шприцами врачом-лаборантом из НИИ Профилактической медицины в процедурном кабинете.
Во время забора крови для анализа у маленьких детей присутствовали их родители.
Из общего числа зарегистрированных членов семей участвовали в исследовании все 35 человек.
Поло-возрастная структура исследуемых представлена следующим образом: мужчин — 19 (54 %), женщин -16 (46,0%). Из них детей до 6 — месяцев — один человек (2,8%), от 6 месяцев до одного года — 1 (2,8 %), от 1 года до 2 лет — не зарегистрировано, от 2 до 3 лет — 1 (2,8%), 3-4 х лет — 3 (8,5%), 5 6 лет — 2 (5,7%), 7-8 лет — 2 (5,7%), 9-10 лет — 1 (2,8%); подростков от 11 до 16 лет — 2 (5,7%); женщин репродуктивного возраста (от 16 до 49 лет) — 8 (22,8%); мужчин от 16 до 49 лет — 7 (20,0%), женщин от 49 лет до 63 лет — 2 (5,7%), мужчин 49-63 лет — 1 (2,8%), женщин пожилого возраста — свыше 63 лет — 2 (5,7%), мужчин пожилого возраста (самому старшему 74 года) — 1 (2,8%) (рис. 1).
Среди обследуемых из 35 человек на диспансерном учёте состояли по поводу соматических заболеваний: 3 с сахарным диабетом второго типа (8,5%), 1 — после перенесенной черепно-мозговой травмы с левосторонним гемипарезом (2,8%), мигренью — 1 (2,8%), олигофренией — 1 (2,8%), гипертонической болезнью — 5 (14,1%), хроническим бронхитом — 1 (2,8%), грыжей межпозвонковых дисков — 1 (2,8%), ребёнок с остаточными явлениями рахита — 1(8,5%), с анемией первой степени — 3 (8,5%), эндемическим зобом — 1 (2,8%). Общая заболеваемость составила 51,4%, остальные 17 человек жалоб не предъявляли и не состояли на диспансерном учёте у семейного врача. Все 13 детей из числа обследованных на 100% получили профилактические прививки по календарю соответственно возрасту (рис. 2)
Рис. 1. Возрастная структура обследованных
Рис. 2. Структура заболеваемости лиц, исследованных на иммуноглобулины
Всем обследуемым в день осмотра проводилась антропометрия (определялись масса тела, рост, детям до 5 лет измерялась верхняя треть левого предплечья для выявления гипотрофии). Подросткам в амбулаторных картах даны заключения по процентильным шкалам, вторичным половым признакам, оценка нервно-психического развития. У взрослого населения с 20 лет и старше подсчитывался индекс массы тела, про-
водился посистемный осмотр всех членов семей с использованием фарингоскопии, отоскопии, риноскопии, подсчёта зубов и оценкой состояния, женщинам репродуктивного возраста — пальпация молочной железы, гинекологический осмотр, мужчинам проводилась пальпация предстательной железы, неврологический осмотр. В конце проводилось консультирование по мерам профилактики глистной инвазии среди членов семей.
Из 35 членов семей, которые не предъявляли жалоб, при сдаче кала на яйца глистов обнаружен карликовый цепень у 9 человек (25,7%). Из них: у детей до 2 -х лет — 1 (11,1%), у детей от 3 до 14 лет — 5 (55,5%), подростки — 1 (11,1%), пожилой мужчина, страдающий сахарным диабетом второго типа, — 1 (11,1%), женщина репродуктивного возраста — 1 (11,1%). Аскаридоз выявлен у 3 членов семей (8,5%), цисты лямблий обнаружены у 2 (5,7%), острицы — у 8 членов семей (22,8%). При исследовании установлено, что из 35 исследуемых у 22 (62,8%) человек обнаружены яйца глистов (рис. 3).
Из общего числа подвергнувшихся исследованию на глистную инвазию на первом месте по частоте отмечался гименолепидоз — у 25,7%, заражённость острицами — у 22,8%, аскаридами — у 8,5%, лямблиями — у 5,7%.
Следующая задача исследования — определить суммарные иммуноглобулины классов М и G к антигенам аскарид, лямблий в крови человека методом иммуноферментного анализа для выявления носительства [5].
При исследовании крови на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам аскарид методом иммуноферментного анализа положительные результаты выявлены у 14 (31,4%) членов семьей: женщин 8 (57,1%), мужчин 6 (42,8%); 8 (57,1%) человек организованного (работающего) населения, 6 (42,8%) — неорганизованного (не работающих).
При исследовании нами определялся титр АТ с целью определения давности заболевания. По определению титра АТ — 1:100 — 5 (35,7%), АТ- 1:200 — 9 (64,9%) (рис. 4). Титр АТ 1:100 расценивается, как отрицательный, АТ 1:200 — положительный результат. Иммунная система человека реагирует на аскариды производством специфических антител. Вначале вырабатывается IgM, который считают маркером острой фазы заболевания. С отставанием на 1-2 недели начинает увеличиваться титр IgG. Затем IgM в сыворотке крови снижается, IgG продолжает увеличиваться. Этот период соответствует стадии перехода инфекции из острой фазы в хроническую. Если организм справляется с инфекцией, то IgG могут длительное время оставаться повышенными. Обычно, спустя 2 месяца после эффективной терапии, уровень IgG опускается ниже критического значения, тем не менее, следует с осторожностью использовать данные анализа IgG в качестве показателя излеченности, поскольку в силу индивидуальных особенностей иммунной системы данные антитела ещё длительное время (3 и более месяцев) могут присутствовать в крови. После IgM начинается выработка IgG, обеспечивающих иммунитет к реинвазии. Таким образом, из общего числа исследуемых 64,9% членов семей заражены аскаридозом.
При исследовании крови на наличие суммарных иммуноглобулинов классов М и G к антигенам лямблий методом иммуноферментного анализа положительные ответы получены у 10 человек (28,5%) среди обследованных членов семей, из них у — 4 женщин (40,0%), 6 мужчин (60%) (рис. 5).
Рис. 5. Распределение членов семей с наличием суммарных иммуноглобулинов М- и G- к антигенам лямблий по полу и количеству
Из общего числа лиц с положительным результатом к антигенам лямблий организованного населения (работающих) было 8 человек (80%), неорганизованного (неработающих) — 2 (20%). По определению титра: АТ — 1:200 — 8 человек (80%), АТ — 1:800 — 2 человека (20%). Диагностический титр АТ 1:200 — результат отрицательный, 1:200 и более — положительный.
Из общего количества исследуемых у 20% членов семей, заражённых лямблиозом, частота распространенности больше среди организованного населения лиц мужского пола.
Таким образом, при исследовании установлено, что из 35 обследованных у 22 (62,8%) человек обнаружены яйца глистов. На первом месте по частоте гименолепидоз — 25,7%, далее: острицы — 22,8%, аскариды — 8,5%, лямблии — 5,7%. Гименолепидоз чаще встречается среди детей от 2 до 14 лет — 7 случаев (31,8%), у женщин репродуктивного возраста — 1 (11,1%). Аскаридоз выявлен у 3 членов семей (8,5%), цисты лямблий обнаружены у 2 (5,7%), а острицы — у 8 (22,8%). По частоте встречаемости глистной инвазии среди членов семей на первом месте гименолепидоз, далее — энтеробиоз, аскаридоз, лямблиоз. При исследовании АТ к аскаридам выявлено, что заражённость чаще встречается среди женского пола, у организованного контингента населения. Из общего числа исследуемых 64,9% членов семей заражены аскаридозом.
При распределении положительных ответов по титру АТ к лямблиям среди членов семьи заболеваемость чаще среди мужского пола у организованного населения.
Заключение
Исследование показало, что параллельное использование копрологических и серологических методов диагностики позволяет более надежно и эффективно выявлять аскаридоз, лямблиоз. Перспективными способами лабораторной диагностики аскаридоза, лямблиоза у человека на сегодняшний день являются методы иммунофлуоресценции и иммуноферментного анализа.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов
ЛИТЕРАТУРА
1. Авдюхина Т.И., Константинова Т.Н., Кучеря Т.В., Горбунова Ю.П. Лямблиоз. Москва, 2003. 32 с.
2. Бандурина Т.Ю., Кнорринг ГЮ. Проблема: диагностики и лечения лямблиоза у детей //TERRA MEDIKA. 2003. №4.С. 23-27.
3. Иванова В.В. Инфекционные болезни у детей. Москва, 2009. С. 553-555.
4. Камардинов Х.К. Инфекционные и паразитарные болезни. Душанбе, 2009. С. 561-564.
5. Камышников В.С. О чем говорят медицинские анализы. Москва, 2009. С.154 -167.
6. Новикова В.П., Калинина Е.Ю., Шабалов А.М., Осмоль- ская Е.А. Лямблиоз. Москва, 2010. 120с.
7. Покровский В.И., Бритко Н.И., Данилкин Б.К. Инфекционные болезни и эпидемиология. Москва, 2000. С. 775 — 779.
8. Шабалов Н.П. Детские болезни. СПб.; Питер, 2011. С. 810 — 816.
RESERENSES
1. Avdyukhina T. I., Konstantinova T. N., Kucherya T. V, Gorbunova Yu. P. Lyamblioz [Giardiasis]. Moscow, 2003. 32 p.
2. Bandurina T. Yu., Knorring G. Yu. Problemy diagnostiki i lecheniya lyamblioza u detey [Problems of diagnosis and treatment of giardiasis in children]. TerraMedika- TerraMedika, 2003, No. 4, pp. 23-27.
3. Ivanova V V Infektsionnye bolezni u detey [Infectious diseases in children]. Moscow, 2009. 553-555 p.
4. Kamardinov Kh. K. Infektsionnye i parazitarnye bolezni [Infectious and parasitic diseases]. Dushanbe, 2009. 561-564 p.
5. Kamyshnikov V S. O chem govoryat meditsinskie analizy [About what speak medical analyzes]. Moscow, 2009. 154 -167 p.
6. Novikova V P, Kalinina E. Yu., ShabalovA. M., Osmolskaya E. A. Lyamblioz [Giardiasis]. Moscow, 2010. 120 p.
7. Pokrovskiy V I., Britko N. I., Danilkin B. K. Infektsionnye bolezni i epidemiologiya [Infectious diseases and epidemiology]. Moscow, 2000. 775 — 779 p.
8. Shabalov N. P. Detskie bolezni [Childhood diseases]. St. Peterburg, 2011. 810 — 816 p.
Сведения об авторах:
Мирзоева Зухра Амондуллоевна — зав. кафедрой семейной медицины ГОУИПОвСЗ РТ, д.м.н., профессор Ортикова Мунира Мамуржоновна — аспирант кафедры семейной медицины ГОУ ИПОвСЗ РТ
Контактная информация:
Ортикова Мунира Мамуржоновна — тел.: +992919251777; E-mail: Ortikova_m@mail.ru
Комментарии